Триптаза сироватки крові (Serum Tryptase)

Триптаза – це трипсиноподібна протеїназа, яка найчастіше міститься в тучних клітинах та базофілах, причому перша містить майже в 300 разів більше триптази. [8] Як така, триптаза є специфічною для гранул тучних клітин і може надавати інформацію про кількість, розподіл та активацію тучних клітин залежно від клінічного контексту. [9] Триптаза здійснює послідовні дії, подібні до гістаміну, а саме як вазоактивна, протизапальна та хіміотактична речовина. [10]

Ген триптази людини кодується на хромосомі 16 та кодує чотири ізоферменти: альфа, бета, гамма, дельта та епсилон. З чотирьох ізоферментів бета-триптаза є переважною формою, що зберігається в гранулі тучних клітин, де вона комплексується як тетрамер, стабілізований протеогліканами, а саме гепарином. [11].

Референтні значення:

Опорний діапазон становить <11,4 нг / мл

Існує лише один комерційно доступний метод вимірювання рівня триптази в сироватці крові людини (ImmunoCap Tryptase, Phadia Laboratory Systems, Уппсала, Швеція). Згідно з дослідженням, цитованим виробниками, значення 95-го перцентилу для триптази сироватки крові, виміряне у 126 здорових людей у віці 12-61 років, становило 11,4 нг / мл.

Середнє геометричне значення – 3,8 нг / мл, а нижня межа виявлення – 1 нг / мл. [1]

Орієнтовні значення для дітей віком від 6 місяців до 18 років виявляються подібними до середніх значень для дорослих з середнім діапазоном 3,5 нг / мл, як було визначено дослідженням на 197 дітей. [2] Однак у немовлят молодше 6 місяців середнє значення 6,1 нг / мл [3]

Інтерпритація:

Рівні триптази 11,5 нг / мл або вище є вказівкою на активацію тучних клітин (як в анафілаксії), або на підвищення загального рівня тучних клітин (як при мастоцитозі)

. Аналіз не розрізняє α або β триптазу (як неактивну мономерну, так і активну тетрамерну форму). Отже, визначення рівнів триптази залежать як від розміру, так і від статусу активації популяції тучних клітин людини, але не є інформаційним щодо конкретного внеску жодного з цих факторів.

Хибнопозитивні та хибнонегативні результати
Хибнопозитивні результати можуть виникати внаслідок наявності гетерофільних антитіл у сироватці пацієнта.

Гетерофільні антитіла, такі як ревматоїдний фактор (РФ) та HAMA, можуть зв’язуватися з імунними глобулінами інших видів і, таким чином, втручатися в імуноферментний аналіз,Присутність цих гетерофільних антитіл може, таким чином, призводити до помилкового підвищення, особливо у осіб, які отримували химерні антитіла (наприклад, Інфліксимаб). [5] Більшість лабораторій, які використовують імуноферментний аналіз на сироватку триптази, використовують реагент з супресором для цих гетерофільних антитіл.

Помилково-негативні результати зазвичай є результатом забору зразків пізніше ніж через 12 годин після появи симптомів.

В даний час доступний аналіз триптази в сироватці крові (ImmunoCap Tryptase, Phadia Laboratory Systems, Уппсала, Швеція) – кількісна флуоресценція для визначення рівнів триптази в сироватці. [1] Аналіз не розрізняє α або β триптазу (як неактивну мономерну, так і активну тетрамерну форму).

Методи
Для забору зразків використовується венепункція. Якщо є підозра на анафілаксію, забір зразків повинен відбуватися через 15 хвилин до 3 годин після появи алергічних ознак та симптомів. Підвищений рівень можна виявити через 3-6 годин після реакції і нормалізувати через 12-14 годин. [6]

Потім сироватку або плазму (результати сумісні між собою) відокремлюють центрифугуванням або через згортання в гелевій сепараторній пробірці. Потрібно щонайменше 0,2-0,5 мл сироватки, це означає, що потрібно зібрати не менше 0,5-1 мл крові. Легкий гемоліз, ліпемія та жовтяниця у зразку є прийнятними.

Якщо забір крові неможливий – змиви з носа є альтернативою. [7] У цьому випадку зразок потрібно розбавити розріджувачами, що входять до комплекту для тестування.

Зберігання та транспортування зразків
Для доставки екземпляр може зберігатися при кімнатній температурі до 2 днів. Зразок може зберігатися при температурі 2-8 ° C, якщо він повинен пройти аналіз протягом 5 днів після збору. Якщо очікуються більш тривалі періоди, зразок слід зберігати при температурі від -20 до -70 ° C. Для аналізу потрібен один день.

ДЖЕРЕЛА:

  1. Thermo Scientific. ImmunoCAP Tryptase. Accessed May, 2014.
  2. Komarow HD, Hu Z, Brittain E, Uzzaman A, Gaskins D, Metcalfe DD. Serum tryptase levels in atopic and nonatopic children. J Allergy Clin Immunol. 2009 Oct. 124(4):845-8.
  3. Belhocine W, Ibrahim Z, Grandne V, Buffat C, Robert P, Gras D. Total serum tryptase levels are higher in young infants. Pediatr Allergy Immunol. 2011 Sep. 22(6):600-7.
  4. Vitte J. Human mast cell tryptase in biology and medicine. Mol Immunol. 2014 May 2.
  5. Sargur R, Cowley D, Murng S, Wild G, Green K, Shrimpton A. Raised tryptase without anaphylaxis or mastocytosis: heterophilic antibody interference in the serum tryptase assay. Clin Exp Immunol. 2011 Mar. 163(3):339-45.
  6. Schwartz LB, Yunginger JW, Miller J, Bokhari R, Dull D. Time course of appearance and disappearance of human mast cell tryptase in the circulation after anaphylaxis. J Clin Invest. 1989 May. 83(5):1551-5.
  7. Rasp G, Hochstrasser K. Tryptase in nasal fluid is a useful marker of allergic rhinitis. Allergy. 1993 Feb. 48(2):72-4.
  8. Castells MC, Irani AM, Schwartz LB. Evaluation of human peripheral blood leukocytes for mast cell tryptase. J Immunol. 1987 Apr 1. 138(7):2184-9.
  9. Valent P. Mast cell activation syndromes: definition and classification. Allergy. 2013 Apr. 68(4):417-24.
  10. Miller HR, Pemberton AD. Tissue-specific expression of mast cell granule serine proteinases and their role in inflammation in the lung and gut. Immunology. 2002 Apr. 105(4):375-90.
  11. Dvorak AM. Ultrastructural analysis of human mast cells and basophils. Chem Immunol. 1995. 61:1-33.
  12. Caughey GH. Tryptase genetics and anaphylaxis. J Allergy Clin Immunol. 2006 Jun. 117(6):1411-4.
  13. van der Linden PW, Hack CE, Poortman J, Vivié-Kipp YC, Struyvenberg A, van der Zwan JK. Insect-sting challenge in 138 patients: relation between clinical severity of anaphylaxis and mast cell activation. J Allergy Clin Immunol. 1992 Jul. 90(1):110-8.
  14. Sampson HA, Muñoz-Furlong A, Campbell RL. Second symposium on the definition and management of anaphylaxis: summary report–Second National Institute of Allergy and Infectious Disease/Food Allergy and Anaphylaxis Network symposium. J Allergy Clin Immunol. 2006. 117(2):391-397.
  15. Akin C, Valent P. Diagnostic criteria and classification of mastocytosis in 2014. Immunol Allergy Clin North Am. 2014 May. 34(2):207-18.
  16. Alvarez-Twose I, Zanotti R, González-de-Olano D, Bonadonna P, Vega A, Matito A. Nonaggressive systemic mastocytosis (SM) without skin lesions associated with insect-induced anaphylaxis shows unique features versus other indolent SM. J Allergy Clin Immunol. 2014 Feb. 133(2):520-8.
  17. Matito A, Morgado JM, Álvarez-Twose I, Sánchez-Muñoz L, Pedreira CE, Jara-Acevedo M, et al. Serum tryptase monitoring in indolent systemic mastocytosis: association with disease features and patient outcome. PLoS One. 2013. 8(10):e76116.
  18. Valent P, Sotlar K, Sperr WR, Escribano L, Yavuz S, Reiter A. Refined diagnostic criteria and classification of mast cell leukemia (MCL) and myelomastocytic leukemia (MML): a consensus proposal. Ann Oncol. 2014 Mar 27. [Medline].
  19. Chusid MJ, Dale DC, West BC, Wolff SM. The hypereosinophilic syndrome: analysis of fourteen cases with review of the literature. Medicine (Baltimore). 1975 Jan. 54(1):1-27. [Medline].
  20. Valent P, Klion AD, Horny HP, Roufosse F, Gotlib J, Weller PF. Contemporary consensus proposal on criteria and classification of eosinophilic disorders and related syndromes. J Allergy Clin Immunol. 2012 Sep. 130(3):607-612.e9.
  21. Chang HW, Leong KH, Koh DR, Lee SH. Clonality of isolated eosinophils in the hypereosinophilic syndrome. Blood. 1999 Mar 1. 93(5):1651-7.
  22. Simon HU, Plötz SG, Dummer R, Blaser K. Abnormal clones of T cells producing interleukin-5 in idiopathic eosinophilia. N Engl J Med. 1999 Oct 7. 341(15):1112-20.
  23. Cools J, DeAngelo DJ, Gotlib J, Stover EH, Legare RD, Cortes J. A tyrosine kinase created by fusion of the PDGFRA and FIP1L1 genes as a therapeutic target of imatinib in idiopathic hypereosinophilic syndrome. N Engl J Med. 2003 Mar 27. 348(13):1201-14.
  24. Sperr WR, El-Samahi A, Kundi M, Girschikofsky M, Winkler S, Lutz D. Elevated tryptase levels selectively cluster in myeloid neoplasms: a novel diagnostic approach and screen marker in clinical haematology. Eur J Clin Invest. 2009 Oct. 39(10):914-23.
  25. Ogbogu PU, Bochner BS, Butterfield JH, Gleich GJ, Huss-Marp J, Kahn JE. Hypereosinophilic syndrome: a multicenter, retrospective analysis of clinical characteristics and response to therapy. J Allergy Clin Immunol. 2009 Dec. 124(6):1319-25.e3.
  26. Klion AD, Noel P, Akin C, Law MA, Gilliland DG, Cools J. Elevated serum tryptase levels identify a subset of patients with a myeloproliferative variant of idiopathic hypereosinophilic syndrome associated with tissue fibrosis, poor prognosis, and imatinib responsiveness. Blood. 2003 Jun 15. 101(12):4660-6.
  27. Chaldakov GN, Fiore M, Stankulov IS, Hristova M, Antonelli A, Manni L. NGF, BDNF, leptin, and mast cells in human coronary atherosclerosis and metabolic syndrome. Arch Physiol Biochem. 2001 Oct. 109(4):357-60.
  28. Cooper PJ, Schwartz LB, Irani AM, Awadzi K, Guderian RH, Nutman TB. Association of transient dermal mastocytosis and elevated plasma tryptase levels with development of adverse reactions after treatment of onchocerciasis with ivermectin. J Infect Dis. 2002 Nov 1. 186(9):1307-13.
  29. Costa JJ, Demetri GD, Harrist TJ, Dvorak AM, Hayes DF, Merica EA. Recombinant human stem cell factor (kit ligand) promotes human mast cell and melanocyte hyperplasia and functional activation in vivo. J Exp Med. 1996 Jun 1. 183(6):2681-6.
  30. Dugas-Breit S, Schöpf P, Dugas M, Schiffl H, Ruëff F, Przybilla B. Baseline serum levels of mast cell tryptase are raised in hemodialysis patients and associated with severity of pruritus. J Dtsch Dermatol Ges. 2005 May. 3(5):343-7.
  31. Liu J, Divoux A, Sun J, Zhang J, Clément K, Glickman JN. Genetic deficiency and pharmacological stabilization of mast cells reduce diet-induced obesity and diabetes in mice. Nat Med. 2009 Aug. 15(8):940-5.
  32. Moreno M, Puig J, Serrano M, Moreno-Navarrete JM, Ortega F, Ricart W, et al. Circulating tryptase as a marker for subclinical atherosclerosis in obese subjects. PLoS One. 2014. 9(5):e97014.
  33. Sperr WR, Hauswirth AW, Valent P. Tryptase a novel biochemical marker of acute myeloid leukemia. Leuk Lymphoma. 2002 Dec. 43(12):2257-61.
  34. Sperr WR, Stehberger B, Wimazal F, Baghestanian M, Schwartz LB, Kundi M. Serum tryptase measurements in patients with myelodysplastic syndromes. Leuk Lymphoma. 2002 May. 43(5):1097-105.

Залишити коментар

Ваша e-mail адреса не оприлюднюватиметься. Обов’язкові поля позначені *